Штамм sphingobacterium multivorum, используемый для получения бактериального удобрения под томаты и огурцы
Владельцы патента RU 2458119:
Изобретение относится к области биохимии. Предложен штамм Sphingobacterium multivorum ВКПМ В-10385,используемый для получения бактериального удобрения под томаты и огурцы. Штамм Sphingobacterium multivorum ВКПМ В-10385 позволяет снизить содержание нитратного азота в плодах огурцов и томатов на 30-40%, повысив при этом урожайность овощной культуры. 1 табл., 6 пр.
Изобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии и представляет собой новый штамм микроорганизмов Sphingobacterium multivorum, который может быть использован в микробиологической промышленности для получения бактериальных удобрений. Микроорганизмы рода Sphingobacterium в Центральном Музее промышленных микроорганизмов (ЦМПМ) ВНИИГенетики до настоящего времени не были депонированы.
Известен штамм микроорганизмов Azotobacter crococcum Б1, депонированный в Центральном Музее промышленных микроорганизмов (ЦМПМ) ВНИИГенетики № В-6013 и предназначенный для получения бактериального удобрения под томаты [1]. Недостатком данного штамма является относительно высокое содержание нитратов в плодах данной культуры, а также огурцов в случае использования для их возделывания бактериального удобрения на основе данного штамма.
Известен также штамм микроорганизмов Azotobacter crococcum Ц40, депонированный в ЦМПМ ВНИИГенетики № В-6012 и предназначенный для получения бактериального удобрения под огурцы [2]. Недостатком данного штамма, который по достигаемому техническому эффекту является наиболее близким к заявляемому нами объекту и выбран нами в качестве прототипа, также является относительно высокое содержание нитратов в плодах данной культуры, а также томатов в случае использования для их возделывания бактериального удобрения на основе данного штамма.
Декларируемая цель достигается путем использования нового штамма Sphingobacterium multivorum 6 F(б), найденного нами в естественных условиях и выделенного в 2006 году из выщелоченного чернозема Буинского района Республики Татарстан. По результатам проведенного анализа сиквенсов вариабельных участков 16s рДНК тестируемый штамм можно отнести к виду Sphingobacterium multivorum (97%). Данный штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП «ГосНИИГенетика» под № В-10385 и характеризуется перечисленными ниже особенностями.
Морфологические признаки. Клетки штамма Sphingobacterium multivorum 6 F(б) в основном одиночные, в молодых культурах палочковидные, на 5-е сутки приобретают шаровидную форму, подвижные, грамотрицательные. Величина клеток 5-суточной культуры на среде Муромцева (1,0% глюкоза, 0,1% аспарагин, 0,02% K2SO4, 0,02% дрожжевой экстракт, 2,0% агар) около 0,5-2,5х3,0-3,5 мкм. На среде Муромцева клетки образуют колонии бежевого цвета, d 0,5-2,0 мм, выпуклые, круглые с ровным краем. С возрастом происходит их объединение в цепочки. Клетки умеренно подвижны, капсула вокруг них незаметна. На твердых средах штамм образует типичные колонии. Покоящаяся форма неизвестна. При старении данная культура микроорганизма приобретает желто-коричневую окраску, которая проявляется в возрасте 2,5-3,0 сут. Пигмент не проникает в среду. Окрашивание клеток может быть проведено анилиновыми красителями по Граму.
Заявляемый штамм не обладает фитотоксичностью (не подавляет всхожесть семян, не ингибирует развитие корней, плодов и зеленой массы растений).
Штамм Sphingobacterium multivorum 6 F(б) обладает способностью прикрепляться к поверхности корней овощных культур, в частности, томатов и огурцов, где функционирует в течение не менее чем 6 мес после инокуляции.
Заявляемый на предмет изобретения штамм Sphingobacterium multivorum 6 F(б) в качестве бактериального удобрения под огурцы и томаты может быть проиллюстрирован посредством нижеследующих примеров.
Пример 2 (по аналогу [1])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 1, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Б1.
Пример 3 (по прототипу [2])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 1, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Ц40.
Пример 5 (по аналогу [1])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 4, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Б1.
Пример 6 (по прототипу [2])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 4, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Ц40.
Как можно видеть из приведенных в Таблице 1 данных, использование заявляемого нами штамма позволяет существенно (на 30-40%) снизить содержание нитратного азота в плодах огурцов и томатов по сравнению с таковым как для штамма-аналога [1], так и для штамма-прототипа [2], сохранив или даже несколько повысив при этом урожайность как той, так и другой овощной культуры.
1. Патент РФ №2076088 (1997).
2. Патент РФ №2074157 (1997) (прототип).
Штамм Sphingobacterium multivorum ВКПМ В-10385, используемый для получения бактериального удобрения под томаты и огурцы.
ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПОЧВЕННЫХ ДИАЗОТРОФОВ ИЗ РОДОВ OCHROBACTRUM И SPHINGOBACTERIUM
Азотфиксация является важнейшим звеном в глобальном цикле азота и наряду с фиксацией углекислого газа обеспечивает продуктивность биосферы в целом [1, с. 259]. Многие природные экосистемы лимитированы по доступным соединениям азота, что придает процессу азотфиксации особое значение в круговороте биогенных элементов. Традиционно основное внимание исследователей было направлено на изучение симбиотической азотфиксации в связи с ее значимостью для сельского хозяйства [6, с. 3]. Однако за последние годы было убедительно показано, что диазотрофия широко распространена среди прокариот, и микроорганизмы, способные фиксировать молекулярный азот, присутствуют практически во всех экосистемах, не связанных с агрокультурой. Именно способность к азотфиксации дает возможность прокариотам существовать в эконишах с крайне низким содержанием азота, а также обогащать окружающую среду азотными соединениями [7, с. 41]. Несмотря на большую экологическую и практическую значимость процесса азотфиксации, до настоящего времени остаются малоизученными вопросы, связанные с оценкой биоразнообразия, а также морфолого-культуральных и физиолого-биохимических свойств свободноживущих в природных экосистемах бактерий-диазотрофов. В связи с вышеизложенным, изучение особенностей природных изолятов бактерий-азотфиксаторов, выделенных из почв экологически неблагополучных регионов Крыма, является актуальной.
Культивирование микроорганизмов проводили в термостате в темноте при температуре 30 ± 1 °С в течение 3-4 суток. Из полученных первичных культур стандартными методами выделяли чистые культуры, характеризующиеся высокой интенсивностью роста на селективных питательных средах. Для идентификации выделенных штаммов использовали метод сравнительного анализа нуклеотидной последовательности генов 16S рРНК, с помощью которого установлено, что выделенные изоляты относятся к видам S phingobacterium multivorum (штамм № 802) и Ochrobactrum anthropi (штамм № 804).
При микрокопировании мазков выявлены одиночные или расположенные в виде коротких цепочек мелкие грамотрицательные умеренно подвижные палочки с закругленными концами, проявляющие нитрогеназную и каталазную активность.
Оптимальная температура роста этих бактерий – +25-30 0 С, минимальная – +4 0 С. Для Sphingobacterium multivorum характерно умеренное образование внеклеточной слизи, а также отсутствие выраженной протеазной активности (желатин не разжижают, не выделяют сероводород). Бактерии штамма № 802 не разлагают твин 80 (полиэтилен гликоль), не гидролизуют крахмал и сахарозу; не растут в присутствии 2,5–6 % NaCl; не проявляют уреазную активность.
Рис.1. Рост колоний Ochrobactrum anthropi на поверхности МПА.
При микрокопировании мазков выявлены одиночные или расположенные в виде коротких цепочек мелкие грамотрицательные подвижные (перитрихи) палочки с закругленными концами (рис. 2). Капсула вокруг клеток не заметна.
Рис. 2. Микропрепарат Ochrobactrum anthropi, окраска по Граму (900×)
Метаболизм Ochrobactrum anthropi аэробного типа, растут бактерии в диапазоне температур от +4 до +37 0 С. При нанесении на поверхность колоний 3 % перекиси водорода наблюдалось выделение пузырьков кислорода, что указывает на выраженную каталазную активность данных микроорганизма. На питательной среде Хью-Лейфсона исследуемые бактерии окисляли D-глюкозу. При проведении биохимических тестов по утилизации углеводов установлено, что бактерии Ochrobactrum anthropi, штамм № 804 ферментировали L-(+)-арабинозу, а также утилизировали L-(+)-рамнозу, D-(+)-рафинозу, D- (+)-галактозу и сахарозу, но не разлагали D-(+)-лактозу. D-(-)-фруктозу, D-(+)-ксилозу, D-(+)-мальтозу (рис. 3).
Рис. 3. Биохимические тесты по утилизации углеводов Ochrobactrum anthropi
Бактерии Ochrobactrum anthropi, штамм № 804 окисляли только этиловый спирт, но не разлагали дульцит, D-(+)-сорбит и D-(-)-маннитол; росли в присутствии цитрата натрия и 2,5% NaCl, т.е. проявляли умеренную галофильность; осуществляли гидролиз крахмала, но не утилизировали твин 80; индол не образовывали; наличие протеолитической активности при росте в жидких питательных средах на основе горохового экстракта с добавлением пептона и тиосульфата натрия проявлялось в выделении H2S и гидролизе желатина; обладали выраженной каталазной, уреазной и нитрогеназной активностью, а также способностью к образованию нитритов.
Максимальная интенсивность роста Ochrobactrum anthropi отмечена на питательной среде Калининской с добавлением мелассы и микроэлементов (30×10 10 КОЕ), минимальная – на среде Федорова без добавления мелассы и микроэлементов (15×10 10 КОЕ).
Рис. 4. Тест на наличие уреазы у Ochrobactrum anthropi
Оба исследованных штамма не обладают фитотоксичностью (не подавляют всхожесть семян, не ингибируют развитие корней и надземных вегетативных органов растений).
В ходе проведенных экспериментов установлено, что бактерии Ochrobactrum anthropi № 804 способны разлагать 2 % глифосат (N-(фосфонометил)-глицин, C3H8NO5P) – неселективный системный гербицид, использующийся для борьбы с сорняками, особенно многолетними. Этот препарат занимает среди гербицидов первое место в мире по производству. В России он известен под торговыми названиями «Раундап», «Глисол», «Торнадо» и «Ураган» [5, с. 50]. Глифосат применяется на посевах широкого спектра сельскохозяйственных культур, в садах и парках, в водном и лесном хозяйстве, на различных стадиях роста: до всходов и после всходов сельскохозяйственных культур (в качестве гербицида) и перед сбором урожая (в качестве десиканта) [2, с. 87]. Хотя производители приводят доказательства безопасности гербицидов на основе глифосата, независимыми исследователями было показано, что этот препарат изменяет почвенную экосистему, влияя на состав и активность микрофлоры, увеличивает восприимчивость культурных растений к болезням, способствует аккумулированию тяжелых металлов в водных экосистемах, оказывая вредное воздействие на гидробионтов. При попадании в организм млекопитающих он приводит к нарушениям функций ряда органов. Глифосат, накапливаясь в почве вследствие сорбции и миграции, может сохраняться в ней в течение нескольких лет [8, с. 6].
Наличие активных ферментных систем катаболизма устойчивых и токсичных соединений неприродного происхождения (ксенобиотиков, в частности таких гербицидов, как глифосат) в сочетании с их способностью к азотфиксации является основанием для включения Ochrobactrum anthropi, штамм № 804 в состав биопрепаратов, способствующие процессам биоремедиации почв и обогащению их доступными для растений соединениями азота.
Таким образом, идентифицированные как представители видов Sphingobacterium multivorum (штамм № 802) и Ochrobactrum anthropi (штамм № 804) изоляты бактерий, выделенные из степных почв Красноперекопского района Республики Крым, обладают выраженной способностью к азотфиксации. Изучение особенностей данных штаммов позволило выявить их основные морфолого-культуральные и физиолого-биохимические свойства, отличающие исследуемых бактерий от других родственных изолятов. Особый интерес представляет собой способность штамма Ochrobactrum anthropi к биодеструкции глифосата, поскольку известны лишь немногие штаммы-деструкторы, способные минерализовать данное соединение. Общая эффективность таких штаммов не всегда высока, поэтому поиск и выделение новых штаммов-деструкторов, таких как штамм № 804 Ochrobactrum anthropi, обладающих эффективным мультиэнзимным комплексом, является актуальным направлением оптимизации биологического земледелия.
ШТАММ SPHINGOBACTERIUM MULTIVORUM, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО УДОБРЕНИЯ ПОД ТОМАТЫ И ОГУРЦЫ Российский патент 2012 года по МПК C12N1/20 C05F11/08
Описание патента на изобретение RU2458119C1
Изобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии и представляет собой новый штамм микроорганизмов Sphingobacterium multivorum, который может быть использован в микробиологической промышленности для получения бактериальных удобрений. Микроорганизмы рода Sphingobacterium в Центральном Музее промышленных микроорганизмов (ЦМПМ) ВНИИГенетики до настоящего времени не были депонированы.
Известен штамм микроорганизмов Azotobacter crococcum Б1, депонированный в Центральном Музее промышленных микроорганизмов (ЦМПМ) ВНИИГенетики № В-6013 и предназначенный для получения бактериального удобрения под томаты [1]. Недостатком данного штамма является относительно высокое содержание нитратов в плодах данной культуры, а также огурцов в случае использования для их возделывания бактериального удобрения на основе данного штамма.
Известен также штамм микроорганизмов Azotobacter crococcum Ц40, депонированный в ЦМПМ ВНИИГенетики № В-6012 и предназначенный для получения бактериального удобрения под огурцы [2]. Недостатком данного штамма, который по достигаемому техническому эффекту является наиболее близким к заявляемому нами объекту и выбран нами в качестве прототипа, также является относительно высокое содержание нитратов в плодах данной культуры, а также томатов в случае использования для их возделывания бактериального удобрения на основе данного штамма.
Декларируемая цель достигается путем использования нового штамма Sphingobacterium multivorum 6 F(б), найденного нами в естественных условиях и выделенного в 2006 году из выщелоченного чернозема Буинского района Республики Татарстан. По результатам проведенного анализа сиквенсов вариабельных участков 16s рДНК тестируемый штамм можно отнести к виду Sphingobacterium multivorum (97%). Данный штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП «ГосНИИГенетика» под № В-10385 и характеризуется перечисленными ниже особенностями.
Морфологические признаки. Клетки штамма Sphingobacterium multivorum 6 F(б) в основном одиночные, в молодых культурах палочковидные, на 5-е сутки приобретают шаровидную форму, подвижные, грамотрицательные. Величина клеток 5-суточной культуры на среде Муромцева (1,0% глюкоза, 0,1% аспарагин, 0,02% K2SO4, 0,02% дрожжевой экстракт, 2,0% агар) около 0,5-2,5х3,0-3,5 мкм. На среде Муромцева клетки образуют колонии бежевого цвета, d 0,5-2,0 мм, выпуклые, круглые с ровным краем. С возрастом происходит их объединение в цепочки. Клетки умеренно подвижны, капсула вокруг них незаметна. На твердых средах штамм образует типичные колонии. Покоящаяся форма неизвестна. При старении данная культура микроорганизма приобретает желто-коричневую окраску, которая проявляется в возрасте 2,5-3,0 сут. Пигмент не проникает в среду. Окрашивание клеток может быть проведено анилиновыми красителями по Граму.
Заявляемый штамм не обладает фитотоксичностью (не подавляет всхожесть семян, не ингибирует развитие корней, плодов и зеленой массы растений).
Штамм Sphingobacterium multivorum 6 F(б) обладает способностью прикрепляться к поверхности корней овощных культур, в частности, томатов и огурцов, где функционирует в течение не менее чем 6 мес после инокуляции.
Заявляемый на предмет изобретения штамм Sphingobacterium multivorum 6 F(б) в качестве бактериального удобрения под огурцы и томаты может быть проиллюстрирован посредством нижеследующих примеров.
Пример 2 (по аналогу [1])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 1, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Б1.
Пример 3 (по прототипу [2])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 1, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Ц40.
Пример 5 (по аналогу [1])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 4, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Б1.
Пример 6 (по прототипу [2])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 4, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Ц40.
Как можно видеть из приведенных в Таблице 1 данных, использование заявляемого нами штамма позволяет существенно (на 30-40%) снизить содержание нитратного азота в плодах огурцов и томатов по сравнению с таковым как для штамма-аналога [1], так и для штамма-прототипа [2], сохранив или даже несколько повысив при этом урожайность как той, так и другой овощной культуры.
1. Патент РФ №2076088 (1997).
2. Патент РФ №2074157 (1997) (прототип).
Похожие патенты RU2458119C1
Реферат патента 2012 года ШТАММ SPHINGOBACTERIUM MULTIVORUM, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО УДОБРЕНИЯ ПОД ТОМАТЫ И ОГУРЦЫ
Изобретение относится к области биохимии. Предложен штамм Sphingobacterium multivorum ВКПМ В-10385,используемый для получения бактериального удобрения под томаты и огурцы. Штамм Sphingobacterium multivorum ВКПМ В-10385 позволяет снизить содержание нитратного азота в плодах огурцов и томатов на 30-40%, повысив при этом урожайность овощной культуры. 1 табл., 6 пр.
Формула изобретения RU 2 458 119 C1
Штамм Sphingobacterium multivorum ВКПМ В-10385, используемый для получения бактериального удобрения под томаты и огурцы.
Активность антибактериальных средств in vitro
Грамотрицательные неферментирующие микроорганизмы широко распространены в окружающей среде. Одной из серьезных проблем является диагностика вызванных ими инфекций, связанная с объективными трудностями их выделения и идентификации. Второй проблемой является то, что для них характерна полирезистентность к антимикробным препаратам, включая те, которые обычно активны против Pseudomonas aeruginosa.
В данном исследовании определялась антибактериальная активность in vitro различных препаратов по отношению к 177 выделенным в клинике штаммам неферментирующих бактерий (кроме Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter spp.). МПК определялась методом разведений в агаре. Использовали среду Мюллера-Хинтона. Оценивали активность ампициллина, пиперациллина, пиперациллин/тазобактама, сульбактама, цефоперазона, цефоперазон/сульбактама, цефтазидима, цефепима, азтреонама, имипенема, меропенема, колистина, гентамицина, амикацина, триметоприм/сульфаметоксазола, хлорамфеникола, эритромицина, рифампицина, норфлоксацина, ципрофлоксацина и миноциклина.
У 7 изолятов: Sphingobacterium multivorum(2), Sphingobacterium spiritivorum(1), Empedobacter brevis(1), Weeksella virosa(1), Bergeyella zoohelcum(1) и Oligella urethralis (1), вместо чувствительности к цефоперазону или сульбактаму определяли чувствительность к амоксициллин/клавуланату и ампициллин/сульбактаму.
Полирезистентность к антибактериальным препаратам была характерна для таких возбудителей, как Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia, Chryseobacterium spp., Myroides spp., Achromobacter xylosoxidans и Ochrobactrum anthropi.
В то же время, такие микроорганизмы, как Pseudomonas stutzeri, Shewanella putrefaciens-algae, Sphingomonas paucimobilis, Pseudomonas oryzihabitans, Bergeyella zoohelcum, Weeksella virosa и Oligella urethralis часто были чувствительны к большинству из тестируемых антибиотиков.
Учитывая, что различные виды возбудителей, образующих группу грамотрицательных неферментирующих микроорганизмов, демонстрируют различные показатели антибиотикорезистентности, для выбора оптимальной схемы лечения требуется проведение микробиологического исследования с идентификацией возбудителя и выявления показателей его антибиотикорезистентности. Феномен полирезистентности, характерный для ряда возбудителей, требует активной разработки новых антибактериальных средств или поиска новых комбинаций антибиотиков, обладающих синергизмом бактерицидного действия по отношению к данным микроорганизмам.
«In vitro» activity of different antimicrobial agents on Gram-negative nonfermentative bacilli, excluding Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter spp. (Vay C.A., Almuzara M.N., Rodriguez C.H., Pugliese M.L., Lorenzo Barba F., Mattera J.C., Famiglietti A.M. Rev. Argent Microbiol., 2005;37(1):34-45).
Код вставки на сайт
Активность антибактериальных средств in vitro
Грамотрицательные неферментирующие микроорганизмы широко распространены в окружающей среде. Одной из серьезных проблем является диагностика вызванных ими инфекций, связанная с объективными трудностями их выделения и идентификации. Второй проблемой является то, что для них характерна полирезистентность к антимикробным препаратам, включая те, которые обычно активны против Pseudomonas aeruginosa.
В данном исследовании определялась антибактериальная активность in vitro различных препаратов по отношению к 177 выделенным в клинике штаммам неферментирующих бактерий (кроме Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter spp.). МПК определялась методом разведений в агаре. Использовали среду Мюллера-Хинтона. Оценивали активность ампициллина, пиперациллина, пиперациллин/тазобактама, сульбактама, цефоперазона, цефоперазон/сульбактама, цефтазидима, цефепима, азтреонама, имипенема, меропенема, колистина, гентамицина, амикацина, триметоприм/сульфаметоксазола, хлорамфеникола, эритромицина, рифампицина, норфлоксацина, ципрофлоксацина и миноциклина.
У 7 изолятов: Sphingobacterium multivorum(2), Sphingobacterium spiritivorum(1), Empedobacter brevis(1), Weeksella virosa(1), Bergeyella zoohelcum(1) и Oligella urethralis (1), вместо чувствительности к цефоперазону или сульбактаму определяли чувствительность к амоксициллин/клавуланату и ампициллин/сульбактаму.
Полирезистентность к антибактериальным препаратам была характерна для таких возбудителей, как Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia, Chryseobacterium spp., Myroides spp., Achromobacter xylosoxidans и Ochrobactrum anthropi.
В то же время, такие микроорганизмы, как Pseudomonas stutzeri, Shewanella putrefaciens-algae, Sphingomonas paucimobilis, Pseudomonas oryzihabitans, Bergeyella zoohelcum, Weeksella virosa и Oligella urethralis часто были чувствительны к большинству из тестируемых антибиотиков.
Учитывая, что различные виды возбудителей, образующих группу грамотрицательных неферментирующих микроорганизмов, демонстрируют различные показатели антибиотикорезистентности, для выбора оптимальной схемы лечения требуется проведение микробиологического исследования с идентификацией возбудителя и выявления показателей его антибиотикорезистентности. Феномен полирезистентности, характерный для ряда возбудителей, требует активной разработки новых антибактериальных средств или поиска новых комбинаций антибиотиков, обладающих синергизмом бактерицидного действия по отношению к данным микроорганизмам.
штамм sphingobacterium multivorum, используемый для получения бактериального удобрения под томаты и огурцы
Изобретение относится к области биохимии. Предложен штамм Sphingobacterium multivorum ВКПМ В-10385,используемый для получения бактериального удобрения под томаты и огурцы. Штамм Sphingobacterium multivorum ВКПМ В-10385 позволяет снизить содержание нитратного азота в плодах огурцов и томатов на 30-40%, повысив при этом урожайность овощной культуры. 1 табл., 6 пр.
Формула изобретения
Штамм Sphingobacterium multivorum ВКПМ В-10385, используемый для получения бактериального удобрения под томаты и огурцы.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии и представляет собой новый штамм микроорганизмов Sphingobacterium multivorum, который может быть использован в микробиологической промышленности для получения бактериальных удобрений. Микроорганизмы рода Sphingobacterium в Центральном Музее промышленных микроорганизмов (ЦМПМ) ВНИИГенетики до настоящего времени не были депонированы.
Известен штамм микроорганизмов Azotobacter crococcum Б1, депонированный в Центральном Музее промышленных микроорганизмов (ЦМПМ) ВНИИГенетики № В-6013 и предназначенный для получения бактериального удобрения под томаты [1]. Недостатком данного штамма является относительно высокое содержание нитратов в плодах данной культуры, а также огурцов в случае использования для их возделывания бактериального удобрения на основе данного штамма.
Известен также штамм микроорганизмов Azotobacter crococcum Ц40, депонированный в ЦМПМ ВНИИГенетики № В-6012 и предназначенный для получения бактериального удобрения под огурцы [2]. Недостатком данного штамма, который по достигаемому техническому эффекту является наиболее близким к заявляемому нами объекту и выбран нами в качестве прототипа, также является относительно высокое содержание нитратов в плодах данной культуры, а также томатов в случае использования для их возделывания бактериального удобрения на основе данного штамма.
Декларируемая цель достигается путем использования нового штамма Sphingobacterium multivorum 6 F(б), найденного нами в естественных условиях и выделенного в 2006 году из выщелоченного чернозема Буинского района Республики Татарстан. По результатам проведенного анализа сиквенсов вариабельных участков 16s рДНК тестируемый штамм можно отнести к виду Sphingobacterium multivorum (97%). Данный штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП «ГосНИИГенетика» под № В-10385 и характеризуется перечисленными ниже особенностями.
Заявляемый штамм не обладает фитотоксичностью (не подавляет всхожесть семян, не ингибирует развитие корней, плодов и зеленой массы растений).
Штамм Sphingobacterium multivorum 6 F(б) обладает способностью прикрепляться к поверхности корней овощных культур, в частности, томатов и огурцов, где функционирует в течение не менее чем 6 мес после инокуляции.
Заявляемый на предмет изобретения штамм Sphingobacterium multivorum 6 F(б) в качестве бактериального удобрения под огурцы и томаты может быть проиллюстрирован посредством нижеследующих примеров.
Пример 2 (по аналогу [1])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 1, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Б1.
Пример 3 (по прототипу [2])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 1, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Ц40.
Пример 5 (по аналогу [1])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 4, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Б1.
Пример 6 (по прототипу [2])
Выполняют по общей технологической схеме Примера 4, но в качестве бактериального удобрения используют штамм Azotobacter crococcum Ц40.
Как можно видеть из приведенных в Таблице 1 данных, использование заявляемого нами штамма позволяет существенно (на 30-40%) снизить содержание нитратного азота в плодах огурцов и томатов по сравнению с таковым как для штамма-аналога [1], так и для штамма-прототипа [2], сохранив или даже несколько повысив при этом урожайность как той, так и другой овощной культуры.